Estudio de la alteración lipídica y oxidación del tocino ahumado con maderas reforestadas Andrea Isabel Pavón Flores Escuela Agrícola Panamericana, Zamorano Honduras Noviembre, 2017 i ZAMORANO CARRERA DE AGROINDUSRIA ALIMENTARIA Estudio de alteración lipídica y oxidación del tocino ahumado con maderas reforestadas Proyecto especial de graduación presentado como requisito parcial para optar al título de Ingeniera en Agroindustria Alimentaria en el Grado Académico de Licenciatura Presentado por Andrea Isabel Pavón Flores Zamorano, Honduras Noviembre, 2017 iii Estudio de la alteración y oxidación lipídica de tocino ahumado con maderas reforestadas Andrea Isabel Pavón Flores Resumen. El tocino es un producto cárnico de cerdo curado y ahumado. Este producto es susceptible a la oxidación debido a su alto contenido de ácidos grasos monoinsaturados. La oxidación puede ser reducida por los fenoles del humo liberado en el proceso de ahumado. Los objetivos de este estudio fueron: evaluar la estabilidad oxidativa y las alteraciones lipídicas del tocino antes y después del ahumado con seis especies maderables y evaluar los parámetros fisicoquímicos del tocino ahumado. Se utilizó un Diseño Completamente al Azar con prueba Tukey para separación de medias. El ahumado se realizó con un generador de humo semi-industrial a partir de las siguientes especies de madera: Eucalipto (Eucalyptus cytridora), Bambú (Bambusa vulgaris), Bracatinga (Mimosa scabrella), Acacia negra (Acacia mearnsii), Acacia (Acacia mangum) y Teca (Tectona grandis), adicionalmente se incluyó un control. La grasa del tocino fue extraída y evaluada mediante el índice de acidez e índice de peróxidos usando métodos de la AOAC. Se evaluó la humedad y el pH del tocino antes y después de ahumado. No se encontró diferencias significativas entre las distintas especies de maderas para los índices de acidez y peróxidos, humedad y pH. El control exhibió mayores índices de peróxidos en relación a otros tratamientos. El humo proveniente de las especies maderables mostró un efecto antioxidante en la grasa del tocino y el proceso de ahumado redujo la humedad del producto. Se recomienda realizar un análisis económico para determinar factibilidad económica de los distintos tipos de madera. Palabras clave: Fenoles, hidroperóxidos, lipólisis. Abstract. Bacon is a cured smoked pork meat product. This product is susceptible to oxidation due to its high content of monounsaturated fats. Oxidation can be reduce through the phenol content of smoke liberated in the smoking process. The goals of this study were to evaluate the oxidative stability and lipidic alterations of bacon after the smoking process with six wood types and assess the physicochemical parameters of bacon before and after smoking with each type of wood. The smoke was produce in a semi-industrial smoke generator using the following wood species: Eucalyptus (Eucalyptus cytridora), Bamboo (Bambusa vulgaris), Bracatinga (Mimosa scabrella), Black Acacia (Acacia mearnsii), Australian Acacia (Acacia mangum), and Teak (Tectona grandis), in addition, there was a control treatment. The bacon fat was extracted and acid and peroxide values were measured using AOAC methods. Humidity and pH were evaluated in bacon before and after smoking process. No differences were found among wood species for acidity, peroxide, pH and humidity. The control treatment showed higher peroxide values compared to other treatments. Smoke provided by different wood species had an antioxidant effect in bacon fat and the smoking process reduced humidity in bacon. It is recommended to make an economic analysis to determine the economic feasibility of the different types of wood. Key words: Hydroperoxides, lipolysis, phenols. iv CONTENIDO Portadilla ............................................................................................................. i Página de firmas .................................................................................................. ii Resumen .............................................................................................................. iii Contenido ............................................................................................................ iv Índice de Cuadros ...................................................................................... ....... v 1. INTRODUCCIÓN ............................................................................................. 1 2. MATERIALES Y MÉTODOS ......................................................................... 3 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ....................................................................... 8 4. CONCLUSIONES ............................................................................................. 13 5. RECOMENDACIONES ................................................................................... 14 6. LITERATURA CITADA .................................................................................. 15 v ÍNDICE DE CUADROS Cuadros Página 1. Composición quimica de las maderas .................................................................... 4 2. Formulación de la salmuera.................................................................................... 4 3. Porcentaje de salmuera inyectada y peso de pacena despues de inyección ........... 5 4. Promedio y desviación estándar para el índice de peroxidos en panceta y tocino ................................................................................................................... 9 5. Promedio y desviación estándar para el índice de acidez en la panceta y tocino ...................................................................................................................... 11 6. Promedio y desviación estándar para porcentaje de humedad en panceta y tocino ...................................................................................................................... 12 7. Promedio y desviacion estándar para pH en panceta y tocino ............................... 13 1 1. INTRODUCCIÓN El consumo de carne mundialmente ha sido considerado muy importante en la dieta humana debido a su alto contenido proteico. El mercado brasilero de carne porcina representa un importante sector de la industria cárnica tanto nacional como mundialmente; 85.6% de la producción es destinada al consumo interno nacional con 14.6 kg/habitante en 2014 (ABPA 2015). Así como el consumo de carne fresca es alta, también lo es el consumo de productos cárnicos procesados ya sean curados, emulsionados, ahumados. Un producto cárnico curado muy consumido en el Brasil y en diferentes países del mundo es el tocino. El tocino es un producto cárnico industrializado obtenido de un corte en el área torácica-abdominal del ganado porcino, con o sin costillas, con o sin piel, agregando ingredientes (cloruro de sodio, nitrito o nitrato de sodio, azúcar y eritorbato de sodio) enviado a un proceso apropiado de ahumado (Ministerio da Agricultura, Secretaría de Defensa Agropecuaria 2000). El consumo de tocino en Brasil ha ido bajando en los últimos años de un 4.9 a un 1.9%. EMBRAPA (2001) realizó encuestas con consumidores y ese estudio concluyó que el tocino en Brasil se consume 1-2 veces por semana, lo cual es considerado como moderado. El ahumado ha sido usado tradicionalmente para prolongar la vida de anaquel de los productos cárnicos, y es aun utilizado en países desarrollados para mejorar la calidad sensorial, color y olor de productos cárnicos (Ledesma et al. 2014). El proceso de ahumado dentro de la industria cárnica comprende distintos tipos de ahumado: ahumado tradicional, mediante la utilización de maderas y el ahumado con humo líquido, siendo éstos diferentes. El humo utilizado para el ahumado tradicional proviene de cualquier tipo de madera ya sea plantas verdes o secas, siendo las plantas dicotiledóneas las más óptimas para la generación de humo ya que contienen troncos más fuertes y compactos, por lo contrario plantas con troncos fibrosos dan un sabor residual a resina no deseado (Ogbadu 2014). Los principales componentes de la madera son celulosa, hemicelulosa y lignina. De la celulosa y hemicelulosa se forman ácidos y aldehídos y de la lignina se forman los fenoles (Tarte 2009). La principal función de los compuestos fenólicos en el humo de madera es ser antioxidantes, esto previene la rancidez en alimentos ahumados. Aproximadamente el 60% de los compuestos fenólicos están conformados por guayacol que es el responsable de brindar el sabor de ahumado y el compuesto syringol responsable por el aroma de ahumado (Ledesma et al. 2014). Ogbadu (2014) menciona que la celulosa y la hemicelulosa son compuestos azucarados que se caramelizan para dar a los compuestos carboxílicos aromas dulces y frutales. No obstante, la lignina provee fenoles que brindan compuestos ahumados, picantes y pungentes provenientes del guayacol, fenol y syringol. 2 En relación a los productos ahumados, los compuestos carboxílicos interactúan con los aminoácidos de la carne, lo que altera su textura y color debido a la Reacción Maillard causando un color café-marrón (Varlet et al. 2007). El tocino es un alimento que tiene un alto contenido de ácidos grasos, este se vuelve susceptible a la oxidación que ocurre principalmente por la degradación de ácidos grasos poli-insaturados causando la presencia de olores y sabores desagradables. La degradación de ácidos grasos puede reducir el valor nutricional y disminuye la vida de anaquel del producto (Ordoñes 2005). Desde el punto de vista de aseguramiento de calidad la determinación del Valor de Peróxido (PV) es una de las medidas de control de calidad más importantes para las grasas y aceites. Este parámetro mide la concentración de los productos de oxidación primaria, principalmente los hidroperóxidos que no son estables y se descomponen para producir productos de oxidación secundaria como son cetonas y aldehídos (Guillén y Cabo 1999). Entre más alto es el valor PV más baja es la estabilidad oxidativa lo cual recurre directamente al afectar la calidad del producto. El análisis de la oxidación de lípidos en muestras de cualquier alimento es un tema relevante debido a que los compuestos secundarios incluyendo aldehídos, cetonas y polímeros producen efectos no deseados sensorial y biológicamente (Barriuso et al. 2013) En cuanto a la evaluación de alteraciones lipídicas se logra midiendo ácidos grasos libres mediante un índice de acidez el cual se aplica en todo aceite refinado, bruto, de origen vegetal o animal (Ordoñes 2005). Para reducir la oxidación lipídica del tocino ahumado, además del ahumado, se utiliza el nitrito de sodio, el cual es un ingrediente que brinda características únicas, siendo estas la formación de color, su función antioxidante y la inhibición de microrganismos. El nitrito es un fuerte inhibidor de la bacteria anaeróbica Clostridium botullinum y controla otros microrganismos patógenos como Listeria monocytogenes (Tarte 2009). En este estudio se evaluaron la acción antioxidante y las alteraciones lipídicas de seis diferentes tipos de maderas reforestadas para el ahumado del tocino; por esta razón los objetivos del estudio fueron:  Evaluar la estabilidad oxidativa y las alteraciones lipídicas del tocino después del ahumado con seis tipos de madera.  Evaluar los parámetros fisicoquímicos del tocino ahumado proveniente de distintas maderas. 3 2. MATERIALES Y MÉTODOS Ubicación del estudio. El estudio se llevó a cabo en las instalaciones del laboratorio de Carnes en el Departamento de Agroindustria, Alimentos y Nutrición en la Universidad de Sao Paulo Escuela Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Piracicaba, Brasil. Adicionalmente, este estudio es parte de una investigación más exhaustiva de la misma universidad que comprende varias etapas en las que se analizan compuestos volátiles e hidrocarburos policíclicos aromáticos, el efecto de diferentes niveles de nitritos de sodio y del humo de distintas maderas en la aceptación sensorial del producto final. Recolección de canal. Las piezas de tocino fueron obtenidas del frigorífico Bressiani ubicado en Capivari, Sao Paulo. Los cerdos utilizados para este estudio fueron provenientes de la raza Agropic 337 puro. La edad de los cerdos antes del sacrificio fue de 150 días, con un pH de 5.71 a 24 hrs post mortem. La dieta alimenticia dada a los animales estaba compuesta por: 70% maíz, 26% soya, 1% aceite y 3% núcleo, 200 g/t de antioxidante (BANOX) y 16 ppm de ractopamina. Se eligieron las canales de cerdo de acuerdo al sexo (macho) y a la limpieza de la canal antes de conducir las canales de cerdos a las cámaras de enfriamiento. El pH y peso se midió en cada canal de cerdo. Los cerdos fueron sujetos al mismo sistema de producción cumpliendo con las normas de higiene y seguridad. Las muestras de materia prima se obtuvieron del corte de barriga cuadrada (barriga torácica abdominal) y se recolectaron al día siguiente después de terminado el proceso de rigor mortis en las canales de cerdo. Adquisición y recepción de la madera. Las maderas de especies Eucalipto (Eucalyptus citriodora), Acacia (Acacia mangium) y Bracatinga (Mimosa scrabella) fueron obtenidas de la Estación Experimental de Ciencias Forestales en Itatinga, Sao Paulo. Las maderas de las especies Teca (Tectona grandis) y Bambú (Bambusa vulgaris) fueron retiradas de plantaciones de la Estación Experimental “Fazenda Aerao,” en Piracicaba, Brasil. Ambas estaciones son administradas por la Escuela Superior de Agricultura “Luiz de Queiroz”, de la Universidad de Sao Paulo (ESALQ/USP).Las muestras de la especie Acacia mearnsii fueron obtenidas por donación de una empresa ubicada en Rio Grande, Brasil. La recolecta de todas estas especies ocurrieron al final del ciclo de rotación de cada especie de ese modo, cada madera fue cortada con siete años de edad a excepción de la Teca (Tectona grandis). Todas las muestras fueron cortadas en un tamaño estandarizado (1-1.5 cm de diámetro) para reducir la 4 influencia sobre la quema en el generador de humo durante el ahumado. El porcentaje de lignina y holocelulosa de las maderas utilizadas en el estudio se muestra en el Cuadro 1. Cuadro 1. Composición química de las maderas. Inyección de la salmuera y cura. Cada pieza de tocino pesó entre 4-6 kg, a cada pieza se le midió el pH antes de inyectarle la salmuera a un porcentaje meta de 20%. La salmuera incluía: nitrito de sodio, eritorbato de sodio, sacarosa refinada, sal y agua (Cuadro 2). El porcentaje de salmuera inyectada se mantuvo en un rango entre el 18-24% y el peso de las pancetas después de inyección se muestran en el Cuadro 3. La inyección de la salmuera se realizó con una inyectora automática de agujas múltiples. Posteriormente las muestras inyectadas fueron almacenadas en refrigeración a una temperatura de 2 °C por 24 h para lograr una penetración homogénea. Cuadro 2. Formulación de la salmuera. Ingredientes Porcentaje Gramos Agua 96.2 868.5 Sal 3.00 27.00 Azúcar 0.60 5.40 Nitrito de sodio 0.015 0.14 Eritorbato de sodio 0.07 0.63 Total 100 900 Madera Lignina Total (%) Holocelulosa (%) Eucalipto 30.98 58.57 Bambú 29.44 64.69 Acacia mangum 28.20 60.96 Acacia mearnsii 27.05 72.51 Teca 28.09 58.59 Bracatinga 29.03 69.49 5 Cuadro 3. Porcentaje de salmuera inyectada y peso de panceta después de inyección Tratamiento Salmuera Inyectada (%) Peso Panceta (Kg) Salmuera Inyectada (%) Peso Panceta (Kg) Salmuera Inyectada (%) Peso Panceta (Kg) Repetición 1 2 3 Control 20 4.62 20 6.34 18 6.34 Eucalipto 19 4.75 21 6.13 20 6.13 Bambú 20 5.38 22 5.89 19 5.89 Acacia mearnsii 20 5.92 21 5.68 24 5.68 Acacia mangium 19 5.40 23 6.05 20 6.05 Bracatinga 23 5.85 23 6.32 21 6.32 Teca 21 6.02 19 6.03 18 6.03 6 Ahumado y cocimiento de la panceta. El proceso de ahumado consistió en cuatro etapas: secado, ahumado y dos cocimientos a distintas temperaturas. Cada madera fue agregada con la misma cantidad (siete litros) en el generador de humo del horno marca Verinox de origen italiano. La primera etapa fue el secado con calor seco a una temperatura de 65 °C por 30 min, con una ventilación alta y con la chimenea abierta completamente. Luego se ahumó la panceta por 60 min a una temperatura de 75 °C con ventilación baja y con la chimenea medio abierta. Después del ahumado se procedió con la primera cocción a 75 °C por 30 min con la chimenea completamente cerrada y una ventilación alta. El segundo cocimiento se realizó a 80 °C hasta lograr 75 °C internamente. Cuando el ahumado finalizó se colocaron los tocinos en un recipiente de plástico y se almacenaron a 2 °C hasta la extracción de la grasa. Extracción de grasa. Se cortó un pedazo de panceta de la pieza a ahumar y finalizado el proceso de ahumado se cortó una pieza del tocino para proceder a extraer la grasa. Se molieron 50 g de tocino y panceta utilizando un molino (Hobart, Estados Unidos de América). El método utilizado para la extracción de grasa fue (Bligh y Dyer 1959). Se prepararon los reactivos (metanol y cloroformo) a utilizar. En un matraz Erlenmeyer se adicionó la muestra de carne ya molida, la mezcla de cloroformo metanol (500 ml) y agua destilada (100 ml). La solución y la carne se mezclaron con un agitador de mesa para lograr una mezcla homogénea por 20 min. Con la mezcla ya homogénea se adicionaron 250 ml de cloroformo y 100 ml de agua destilada más en el matraz Erlenmeyer. Luego se filtró la solución utilizando un embudo de separación y papel de filtro. Toda la solución se dejó reposar en el embudo de separación por 24 h. Al día siguiente se filtró la fase inferior del embudo (fase de cloroformo) utilizando un embudo de vidrio y se pasó por el roto-evaporador para eliminar la fase cloroformo. Siendo eliminada la fase cloroformo, la grasa se extrajo y se colocó en un horno secador a 26 °C por 1 h para luego pesarlas. En un matraz Erlenmeyer se pesaron 5 ± 0.03 g de grasa para las muestras dirigidas a ser pesadas por índice de peróxidos y 7 ± 0.03 g para las muestras de índice de acidez. Índice de peróxidos. Se prepararon los reactivos a utilizar: solución de ácido acético y cloroformo (3:2), ioduro de potasio saturado, goma de almidón al 1% y tiosulfato de sodio al 0.1M. El método a utilizar para la evaluación del índice de peróxidos fue el especificado por AOCS (1995). 7 La muestra ya pesada se colocó en un matraz Erlenmeyer y luego se agregó 30 ml de la solución de ácido acético-cloroformo para disolver la muestra. Con la solución ya disuelta se agregó 0.5 ml de la solución de ioduro de potasio saturado, se mezcló en matraz Erlenmeyer y se dejó en reposo por 1 min. Luego se adicionaron 30 ml de agua destilada y 0.5 ml de goma de almidón concentrada al 1%. Luego se tituló con tiosulfato de sodio 0.1M con una constante agitación. Se continuó la titulación hasta que el color azul desapareció y la solución tuviera un color blanco. La ecuación siguiente se utilizó para realizar el cálculo de índice de peróxido en la muestra (IP). 𝐼𝑃 ( 𝑚𝑒𝑞 𝑘𝑔 ) = 𝑁∗(𝐴−𝐵)∗1,000 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 (𝑔) [1] Dónde: A: Volumen (ml) de tiosulfato gastado para titular la muestra. B: Volumen (ml) de tiosulfato gastado para titular hasta que llegue a una coloración blanca. Índice de acidez. Utilizando el método de (ISO 1996) se llevó a cabo al análisis de índice de acidez. Se prepararon los reactivos a utilizar en esta muestra de solución en un matraz Erlenmeyer; luego se agregó la cantidad específica de alcohol y 2 mL de indicador de fenolftaleína. Se aplicó calor hasta 65 °C para luego titular con hidróxido de sodio, agitando vigorosamente hasta aparecer la primera coloración rosa, la cual debió permanecer por 30 s. Se procedió a realizar los cálculos con la siguiente ecuación. Í𝑛𝑑𝑖𝑐𝑒 𝑑𝑒 Á𝑐𝑖𝑑𝑒𝑧 = 𝑚𝐿 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠∗56.1∗𝐹 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 [2] Análisis fisicoquímicos. Para la determinación de la humedad se utilizó el método ISO 1442:1997 haciendo el cálculo de peso inicial menos peso final. Para la medición de pH se utilizó un potenciómetro. Diseño experimental. Para el estudio de índice de acidez, índice de peróxidos y los parámetros fisicoquímicos (pH, Aw y humedad) se utilizó un DCA (Diseño Completamente al Azar) con una separación de medias utilizando la prueba Tukey para evaluar diferencias entre tratamientos. También, se utilizó una prueba T de muestras apareadas para evaluar el antes y después del ahumado en el tocino. Los tratamientos en este experimento fueron siete, seis de ellos representando a cada una de las diferentes maderas Eucaplito, Bracatinga, Bambú, Teca, Acacia mearnsii, Acacia mangum más el control. Para los análisis estadísticos se utilizó una probabilidad de significancia del 5%. Se realizaron tres repeticiones para cada experimento. El análisis de datos se realizó a través de “Statistical Analysis System” (SAS versión 9.1®). 8 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Índice de peróxidos. Los índices de peróxidos obtenidos en los tocinos ahumados con distintas maderas utilizadas no mostraron diferencias significativas (P>0.05) (Cuadro 4). A pesar de tener una diferente composición química, con contenidos de lignina diferentes (Cuadro 1), las seis distintas especies de madera brindaron la misma estabilidad oxidativa a la grasa del tocino. Sin embargo, el tratamiento control mostró un índice de peróxidos más alto en comparación con los tocinos ahumados con las distintas maderas usadas en el estudio. Esto se atribuye al efecto antioxidante del humo de la madera, mediante la liberación de los compuestos fenólicos y el contenido de lignina de la madera (Ledesma et al. 2014). Según Tóth y Potthast (1984) el proceso de formación de hidroperóxidos que degradan la calidad de la grasa pueden ser prevenidos por antioxidantes, los cuales tienen una estructura fenólica. Estos compuestos fenólicos están presentes en el humo de las maderas los cuales son: guayacol, eugenol, isoeugenol, hidroquinona y pirocatechol (Seher 1967). En adición a la deposición de humo en los productos ahumados, el humo reduce la carga microbiana, mejora el sabor y actúa como un antioxidante que previene la degradación lipídica (Daun 2008). Cuadro 4. Promedio y desviación estándar para el índice de peróxidos en panceta y tocino. Tratamiento Índice de peróxidos Panceta (meq/kg) Tocino (meq/kg) Control 11.627 ± 1.615Aa 8.553 ± 0.919Ba Eucalipto 12.283 ± 2.875Aa 1.693 ± 1.039Bb Teca 4.894 ± 4.724Aa 1.157 ± 0.453Bb Bambú 6.543 ± 2.263Aa 1.000 ± 0.300Bb Bracatinga 9.187 ± 2.088Aa 0.897 ± 0.163Bb Acacia mearnsii 8.157 ± 4.358Aa 0.673 ± 0.294Bb Acacia mangum 17.237 ± 8.965Aa 0.450 ± 0.565Bb CV% 42.60 27.80 ABLetras diferentes entre filas indican diferencias significativas entre tipo de carne (P<0.05). abLetras diferentes en la misma columna indican diferencias significativas entre tratamientos (P<0.05). CV: Coeficiente de Variación. 9 Estos hidroperóxidos formados en el tocino control definen la calidad de la grasa y su grado de rancidez. Son parte de la oxidación primaria que produce compuestos volátiles y no volátiles aumentando la descomposición de las grasas durante la fase inicial de oxidación. Por ende este índice de peróxidos es un indicador de las fases iniciales de cualquier cambio oxidativo (Shahidi 2005). Según Frankel (1984), el principal proceso de oxidación de los lípidos es la auto-oxidación, el cual es un proceso de radicales libres que envuelven las etapas de iniciación, propagación y terminación. La etapa de iniciación se lleva a cabo con la eliminación de un hidrógeno de un carbono de metileno en la presencia de metales, calor o luz, y los radicales libres de lípidos (L*) reaccionan con oxígeno para formar radicales de peróxido (LOO*). Este proceso afecta los ácidos grasos poliinsaturados principalmente, ya que es más fácil remover un hidrógeno de un carbono de metileno a medida que el número de dobles enlaces aumenta. En el Cuadro 1 se observan diferencias (P<0.05) en el índice de peróxidos antes (panceta) y después del ahumado (tocino) para cada uno de los tratamientos evaluados, obteniéndose una mayor cantidad de hidroperóxidos en la panceta curada y no ahumada. Esto concuerda con el estudio de White (1944) en donde se obtuvo una menor cantidad de peróxidos formados en el tocino ya ahumado comparado con la panceta antes de ahumar obteniendo valores en promedio de 0.84 a 4 meq/kg para el tocino ya ahumado y 3 a 10.07 meq/kg para panceta antes del ahumado. Atribuyendo al proceso de ahumado un aplazamiento en la formación de peróxidos, alargando la vida de anaquel del producto y mejorando la calidad de la grasa. Durante el proceso del curado también se obtiene un efecto antioxidante debido al uso de nitrito de sodio en la salmuera como reportado por (Motilva et al. 1992). Estos autores determinaron que el efecto del humo proveniente de la quema de madera en tocinos reducía en mayor cantidad el contenido de hidroperóxidos. La AOAC (1995) establece que existe un rango de peróxidos esperados de acuerdo a su contenido de muestra, en este caso se utilizaron muestras de grasa de 5 ± 0.05g. Para esa cantidad de grasas se espera un rango de 0-10 meq/kg de hidroperóxidos formados. Ciertas muestras de panceta excedieron este rango. Según Aminullah Bhulyan et al. (1986) la sal en pequeñas concentraciones puede actuar como un pro-oxidante. A la panceta se le adicionó un 3% de sal lo que pudo contribuir al mayor índice de peróxidos encontrados en este estudio. El nitrito de sodio adicionado a la sal de cura pudo actuar como antioxidante en el producto. Los valores de índice de peróxidos reportados en el tocino están por debajo del límite nacional de China el cual es de (0.5g/100g de grasa), lo cual define que el producto es seguro y apto para el consumidor (Wu et al. 2016). Índice de acidez. En el Cuadro 5 se observa que no existió diferencia (P>0.05) en el índice de acidez entre las maderas usadas para ahumar el tocino, ni antes ni después del proceso de ahumado. Tampoco hubo diferencia (P>0.05) entre el control y las distintas maderas estudiadas. Esto concuerda con el estudio realizado en pescado ahumado por Aminullah Bhulyan et al. (1986) y con el estudio de White (1944) en tocino ahumado, los cuales no evidenciaron 10 diferencias en la liberación de ácidos grasos libres entre los procesos antes y después de ahumado. Kardash y Tur'yan (2005) demostraron que un incremento en la cantidad de ácidos grasos libres en una muestra de aceites o grasas indicaba la presencia de hidrólisis en los triglicéridos. Esta reacción ocurre mediante la acción de la enzima lipasa la cual es un indicador de condiciones inadecuadas de procesamiento y almacenamiento. Por otro lado, Molly et al. (1997) define el proceso de liberación de ácidos grasos libres como una lipólisis, misma que es gobernada por un conjunto de enzimas específicas llamadas lipasa y fosfolipasa que llevan a la formación de ácidos grasos libres. La lipólisis y la oxidación de los lípidos se espera que estén relacionadas debido a la emisión de los ácidos grasos libres los cuales son más susceptibles a la oxidación que los ácidos esterificados (Muriel et al. 2007). Por ende, entre mayor liberación de ácidos grasos libres, existe una mayor oxidación, lo cual causa una mayor degradación de la grasa. Sin embargo, en este estudio no se encontró una relación entre la oxidación lipídica y la lipólisis, al igual que en el estudio realizado por Jin et al. (2010). Los triglicéridos según Huang et al. (2013) influyen en la liberación de los ácidos grasos libres en la grasa del tocino, lo cual depende mucho del contenido total de lípidos iniciales en la carne de cerdo influenciada por la dieta del animal. A esto se puede atribuir el bajo contenido de ácidos grasos libres en este estudio, tanto en la panceta no ahumada como en el tocino ahumado. Cuadro 5. Promedio y desviación estándar para el índice de acidez en panceta y tocino. Tratamiento Índice de acidez Panceta Tocino Control 1.187 ± 3.160Aa 2.654 ± 0.043Aa Eucalipto 1.490 ± 1.402Aa 1.923 ± 0.245Aa Teca 1.107 ± 0.116Aa 0.906 ± 0.178Aa Bambú 1.103 ± 0.134Aa 0.813 ± 0.243Aa Bracatinga 0.897 ± 0.145Aa 0.853 ± 0.072Aa Acacia mearnsii 0.963 ± 0.192Aa 0.980 ± 0.258Aa Acacia mangum 0.797 ± 0.344Aa 1.123 ± 0.236Aa CV% 42.36 28.65 ANo hubo diferencias significativas entre filas (P>0.05). aNo hubo diferencias significativas entre tratamientos. (P>0.05). Según Jerković et al. (2007), los lípidos muestran una lipólisis intensa durante el curado, especialmente durante la adición de sal y después de la adición de sal, mientras los ácidos grasos libre se acumulan como un resultado de la hidrólisis de los triglicéridos. Las enzimas lipasas son las principales encargadas de la acción hidrolítica en las grasas, las cuales actúan en su mayoría en alimentos con ambientes salados y secos (Motilva et al. 1992). La panceta utilizada en el estudio contenía una baja concentración de sal (3%) y a eso se atribuye también un bajo índice de acidez. 11 Aminullah Bhulyan et al. (1986) reportaron una hidrolisis lipídica en el tejido muscular de pescado cuando este fue calentado y ahumado por 90 min a 100 °C. En este estudio se ahumó y cocinó el tocino de 65 °C a 75 °C durante 5 h, por ende, la actividad de las enzimas hidrolíticas fue controlada reduciendo la lipólisis durante el proceso de ahumado. Jiang et al. (2014) recomienda temperaturas mayores a 40 °C para lograr reducir la actividad enzimática de la lipasa y que la actividad de la fosfolipasa predomine. Sin embargo, la enzima fosfolipasa al incrementar la temperatura tiene baja actividad enzimática (Chemat 2017). Análisis de humedad. El contenido de humedad en un alimento influencia el sabor, la textura, el peso, la apariencia y la vida de anaquel del producto (Nielsen 2010). En la elaboración de un alimento el contenido de humedad suele variar dependiendo del tipo de procesos, en este estudio se determinó la humedad de la panceta curada y el tocino ahumado como se observa en el Cuadro 6. El porcentaje de humedad del tocino en comparación con el de la panceta fue diferente para cada uno de los tratamientos evaluados (P<0.05). Según Guo et al. (2010, 2016) esto se debe a la deshidratación osmótica de la sal durante la cura y también a los procesos de cocimiento y ahumado. En comparación con el contenido de humedad de otros productos curados como el lacón (Marra et al. 1999) y el jamón ibérico (Martín et al. 1999), el tocino tiene un menor contenido de humedad debido a que es un producto cárnico con menor tamaño y grosor; y tiene una mayor área superficial por unidad de peso, lo que acelera la deshidratación durante el proceso y resulta en un alimento con baja humedad (Jin et al. 2010). Cuadro 6. Promedio y desviación estándar para el porcentaje de humedad en panceta y tocino. Tratamiento Humedad Panceta (%) Tocino (%) Control 65.310 ± 3.350Ba 44.177 ± 6.643Aa Eucalipto 64.953 ± 5.135Ba 48.975 ± 6.049Aa Teca 63.765 ± 8.812Ba 47.650 ± 4.845Aa Bambú 55.770 ± 2.292Ba 47.147 ± 2.030Aa Bracatinga 56.460 ± 0.625Ba 46.633 ± 2.985Aa Acacia mearnsii 49.746 ± 6.195B 43.630 ± 0.760Aa Acacia mangum 61.460 ± 3.700Ba 50.050 ± 5.669Aa CV% 8.34 11.06 ABLetras diferentes entre filas indican diferencia significativa (P<0.05). aNo hubo diferencias significativas entre tratamientos (P>0.05). (Prueba Test-Tukey y prueba T) 12 No se obtuvo una diferencia significativa (P>0.05) en el porcentaje de humedad entre los tratamientos. Por ende, el uso de madera no afectó directamente al contenido de humedad del tocino. Análisis de pH. Como se observa en el Cuadro 7, el pH no varió entre la panceta y el tocino mostrando que no existe diferencia (P>0.05) antes y después del ahumado. El pH de ambos (panceta antes de ahumado y después de ahumado) se mantuvo en un rango entre 5.4 y 6.4 al igual que en el estudio realizado por Jin et al. (2010) con tocino curado y madurado. Esta fluctuación en el valor del pH, según Guo et al. (2016) se debe principalmente a la generación de ácidos grasos libres y amino ácidos por la degradación lipídica y proteica. Cuadro 7. Promedio y desviación estándar para el pH en panceta y tocino. Tratamiento pH Panceta Tocino Control 6.006 ± 0.163Aa 6.337 ± 0.190Aa Eucalipto 6.030 ± 0.206Aa 6.197 ± 0.174Aa Teca 6.120 ± 0.613Aa 6.207 ± 0.201Aa Bambú 6.067 ± 0.160Aa 6.112 ± 0.116Aa Bracatinga 6.010 ± 0.227Aa 6.063 ± 0.106Aa Acacia mearnsii 6.062 ± 0.150Aa 6.110 ± 0.202Aa Acacia mangum 5.925 ± 0.259Aa 6.100 ± 0.159Aa CV% 4.66 2.66 ANo hubo diferencias significativas entre filas (P>0.05). aNo hubo diferencias significativas entre tratamientos (P>0.05). 13 4. CONCLUSIONES  La utilización del humo proveniente de las maderas reforestadas de Brasil redujo la oxidación lipídica del tocino.  El proceso de ahumado utilizando maderas reforestadas de Brasil no tuvo un efecto en la liberación de ácidos grasos libres en el tocino.  El proceso de cocción y ahumado redujo la humedad del tocino, sin embargo los tipos de madera no influyeron en estar educción. 14 5. RECOMENDACIONES  Realizar un estudio con medidas repetidas en el tiempo para determinar el efecto oxidativo del tocino durante el almacenamiento con los diferentes tipos de madera.  Realizar un estudio económico de las distintas maderas para determinar cuál es más factible de implementar dentro de la industria cárnica brasileña.  Realizar un estudio de cromatografía de gases para obtener un perfil de ácidos grasos presentes en cada pieza de tocino y evaluar si existen diferencias significativas entre cada madera utilizada. 15 6. LITERATURA CITADA ABPA. 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