PROYECTO ESPECIAL DE GRADUACIÓN

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Examinando PROYECTO ESPECIAL DE GRADUACIÓN por Materia "2,4-D"

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    Callogénesis in vitro de El Redondo (Magnolia yoronconte Dandy) a partir de la siembra apolar de explantes foliares
    (Zamorano: Escuela Agricola Panamericana, 2016, 2005) Llive C., Freddy M.; Espinal, Dinie; Pilz, George; Linares, José
    Los bosques latifoliados en los últimos años se han visto afectados por la pérdida de la biodiversidad, debido principalmente a la sobreexplotación de especies maderables. El Redondo (Magnolia yoroconte), por ser una especie endémica de la región centroamericana, también se ha visto afectada por este hecho, por tener baja regeneración natural. El cultivo de tejidos por ser una técnica de respuesta rápida y regeneración masiva fue utilizado en el estudio con el objetivo de crear un protocolo de establecimiento a partir de explantes foliares maduros.
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    Efecto de fitohormonas en la callogénesis in vitro de café -variedad Obatá-
    (Zamorano: Escuela Agrícola Panamericana, 2019., 2019) Cruz M., Jorge F.; Bravo, María ; Martínez, Cinthya
    Las plagas y enfermedades en el cultivo de café han incrementado, requiriendo el uso de tecnologías para propagar variedades resistentes. Una de las principales alternativas para producir plantas sanas y genéticamente iguales en grandes cantidades es la propagación in vitro. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de fitohormonas en explantes foliares de café variedad Obatá. Las fitohormonas evaluadas fueron ácido salicílico 1.38 µg/L, 2,4-D 0.5 mg/L, 2,4-D 0.25 mg/L+ kinetina 0.5 mg/L, picloram 0.1 mg/L y thidiazuron (TDZ) 0.2 mg/L. Se evaluó el crecimiento callogénico, presencia en bordes y nervadura y características del callo (compacto y/o friable) por explante para cada uno de los tratamientos. Se utilizó un diseño completamente al azar. El ácido salicílico, TDZ y picloram no indujeron la formación de callo en los explantes. El medio suplementado con 2,4-D + kinetina fue el que presentó el mayor porcentaje (96%) de explantes con callo. 2,4-D presentó mayor porcentaje de callo compacto (69%) y de 2,4-D + Kinetina presentó mayor porcentaje de callo compacto + friable (45%) y mayor porcentaje de bordes con callo (79%). El medio suplementado con 2,4-D 0.25 mg/L + Kinetina 0.5 mg/L es el más favorable para la formación de callo compacto en explantes foliares de café variedad Obatá.
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    Establecimiento in vitro de Abies guatemalensis (Pinabete) a partir de embriones cigóticos
    (Zamorano: Escuela Agrícola Panamericana, 2012., 2012) Pérez G., José M.; Demetrio R., Samuel; De Rueda, Dinie; Bravo, María; Rueda, Alfredo
    Pérez Gómez, J.M. y S.D. Ramos Martín. 2012. Establecimiento in vitro de Abies guatemalensis (Pinabete) a partir de embriones cigóticos. Proyecto especial de graduación del programa de Ingeniería Agronómica, Escuela Agrícola Panamericana, Zamorano. Honduras. 22 p. El pinabete Abies guatemalensis es una especie endémica de Guatemala que está en peligro de extinción debido al bajo porcentaje de viabilidad de su semilla y a su valor comercial. El objetivo de este experimento fue establecer in vitro y formar de tejido callogénico en pinabete. Para el establecimiento in vitro del material se desarrollaron tres diferentes procedimientos de desinfección de la semilla utilizando hipoclorito de sodio (NaClO con 4.5% i.a.) con tres tiempos de exposición (10, 20 y 30 minutos) y agua oxigenada (H2O2 con 3.34% i.a.) durante 24 horas de inmersión. Para el desarrollo de embriones se evaluaron tres concentraciones de microelementos: 0x, 1x y 5x, tomando como base la formulación basal de Murashige y Skoog (MS) (1962), en la presencia y ausencia de carbón activado. Para la inducción de tejido callogénico se evaluó el efecto de las fitohormonas Kinetina y BAP, ambas a una concentración de 0.1mg/L, en explantes hipocotiledonares, cotiledonares y embrionarios, en los medios basales Woody Plant Medium (WPM) y MS. Para cada una de las pruebas se utilizó el Diseño Completo al Azar, con tres réplicas por tratamiento, realizando una separación de medias en cada uno utilizando la prueba Duncan con una P≤ 0.05. El método de desinfección basado en H2O2 al 10% durante 24 horas obtuvo los más bajos índices de contaminación (29% del total de los individuos evaluados). Los tratamientos en que se utilizó NaClO, no presentaron resultados favorables. En las pruebas de medios de cultivo con variación en la concentración de microelementos y la influencia del carbón activado en el medio, se observa que los microelementos son un factor influyente en el desarrollo de embriones, siendo las concentraciones 1x y 5x las que mejores resultados presentaron. El uso o no del carbón activado en la etapa de establecimiento no presentó diferencias. Los embriones fueron los explantes que mejor formaron tejido callogénico. El BAP presentó los mejores resultados en el porcentaje de formación de tejido callogénico.
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    Evaluación de dos medios de cultivo para la formación de callo en pétalos y estaminoides de cacao (Theobroma cacao L.) cultivados in vitro
    (Zamorano: Escuela Agrícola Panamericana, 2019., 2019) Hidalgo E., Sebastián; Bravo, María ; Martínez, Cinthya
    El cacao (Theobroma cacao L.) es originario de América del sur, pertenece a la familia de las Malvaceas. En cultivo de tejidos el uso de fitohormonas en el medio permite controlar procesos de crecimiento y desarrollo en los explantes. El objetivo de este estudio fue evaluar la respuesta en la formación de callo en pétalos y estaminoides de cacao en los medios de cultivo Murashige (MS) y Skoog y Driver-Kuniyuki Walnut, (DKW) este modificado con los macroelementos MS y ambos suplementados con 2,4-D 2 mg/L y Thidiazuron 0.025 mg/L. Se evalúo la fenolización de los pétalos y estaminoides a los siete días después de siembra, y el crecimiento de estructuras callogénicas sobre estaminoides y pétalos de cacao variedades ISC-1 y Cauca 39. No se observó fenolización de los explantes de ambas variedades. En los estaminoides se obtuvo el crecimiento de estructuras callogénicas en ambos medios. En la variedad ISC-1, el medio en el que creció un mayor porcentaje de masa callogénica sobre los estaminoides fue el DKW suplementado con 2,4-D 2 mg/L y Thidiazuron 0.025 mg/L. En los pétalos de la variedad ISC-1 se observó la formación de estructuras con potencial embriogénico. La formación de callo en cacao utilizando estaminoides es influenciada por el medio de cultivo y los reguladores de crecimiento utilizados.
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    Evaluación del uso de ápices meristemáticos y explantes cotiledonares e hipocotiledonares en el establecimiento in vitro de Tabebuia rosea (Bertol) DC (macuelizo)
    (Zamorano: Escuela Agrícola Panamericana, 2014., 2002) Pavón B., Carlos F.; De Rueda, Dinie; Rueda, Alfredo
    La Tabebuia rosea es una especie de mucha importancia, que se distribuye por toda Mesoamerica y se usa como: ornamental, madera y medicina natural. La micropropagación no se ha aplicado a esta especie por esto el laboratorio de Cultivo de Tejidos de Zamorano se realizó un estudio para evaluar el uso de 4 partes tipos de explantes iniciales obtenidos a partir de vitroplántulas para el establecimiento in vitro de Tabebuia rosea. El ensayo se dividió en cinco fases: Experimento 1, se evalúo el establecimiento in vitro de explantes cotiledonares, hipocotiledonares y de hojas verdaderas en un medio de cultivo Murashige y Skoog (MS) con 8 μM de Bencilaminopurina (BAP). Para los explantes cotiledonares y de hojas verdaderas, se evalúo el efecto del método de siembra (polar y apolar) y la presencia o ausencia de corte. El experimento tuvo un arreglo factorial incompleto de 9 tratamientos en total. Se obtuvo mayor Porcentaje de Tejido Callogénico (PC) en los explantes cotiledonares con siembra apolar. La realización de corte no se recomienda. Las hojas verdaderas mostraron alto Porcentaje de Oxidación (PO) lo que afecta su regeneración. Experimento 2a, se evalúo el establecimiento in vitro de ápices meristemáticos con utilización de cinco niveles de BAP (0, 5, 10, 15, 20 μM) en un medio de cultivo Gamborg (B5). Se encontró mayor Número de Brotes por Explante (NBE) y con una Altura por Brote (APB) adecuada en los ápices sembrados en el medio de cultivo con 10 μM de BAP. Experimento 2b, se evalúo el enraizamiento in vitro de las porciones apicales y rebrotes de los ápices sembrados en el 2a con utilización de 15 μM de Acido Indolebutírico (AIB) en un medio de cultivo B5. El nivel de AIB utilizado no estimuló la diferenciación radical en los explantes. Experimento 3a, se evalúo el establecimiento in vitro de explantes cotiledonares e hipocótiledonares con utilización de tres niveles de Acido 2,4-diclorofenoxyacetico (2,4-D) (0, 0.9, 1.8 μM) y cuatro niveles de BAP (0, 5, 10, 15 μM) en un medio de cultivo B5. El experimento tuvo un arreglo factorial completo de 24 tratamientos en total. Los dos tratamientos con mayor PC fueron: Cotiledones con 2,4-D a razón de 0.9 μM e hipocótilos con 2,4-D y BAP a razón de 0.9 μM y 5 μM respectivamente. Experimento 3b, se evalúo la multiplicación in vitro del tejido callogénico de los dos tratamientos de mayor PC del 3a con la utilización de cinco niveles (0, 2.25, 4.5, 6.75, 9 μM) de 2,4-D en un medio de cultivo B5. El experimento tuvo un arreglo factorial completo de 10 tratamientos. Los dos tratamiento sin presencia de 2,4-D mostraron las mayores tasas de multiplicación. En conclusión, el cultivo de ápices meristemáticos es una alternativa factible para propagar la especie, ya que se obtuvo proliferación de brotes basales y nudos que aumentan el material vegetal disponible para la multiplicación masiva. Los explantes cotiledonares e hipocotiledonares mostraron adecuada formación de tejido callogénico y se puede utilizar como explante para la inducción de morfogénetica.